-
技術(shù)文章
堿性成纖維生長因子(bFGF)的藥理作用和臨床應(yīng)用
堿性成纖維生長因子(簡稱bFGF)是哺乳動物和人體內(nèi)存在的一種微量物質(zhì),在多種組織細胞中分布有bFGF受體,因而其生理作用廣泛,是一種多功能細胞生長因子,bFGF于1974年首先由美國科學(xué)家Gospodarowicz從牛垂體中分離出,方法復(fù)雜,價格昂貴?,F(xiàn)在運用基因工程技術(shù),由大腸桿菌可大量表達生產(chǎn)高活性、高純度的bFGF,從而使之大規(guī)模應(yīng)用于臨床。國內(nèi)外大量研究結(jié)果表明,bFGF通過促進與創(chuàng)傷修復(fù)有關(guān)的幾乎所有細胞的迅速增殖而推動創(chuàng)面主動修復(fù),顯著縮短創(chuàng)面愈合時間,全面提高...
+
-
技術(shù)文章
石蠟切片免疫組化染色步驟
1、載玻片的處理:抗原修復(fù)過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001APES、ZLI-9003HistogripTM或ZLI-9005Poly-L-Lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:1.1APES:現(xiàn)用現(xiàn)配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中,停留20~30秒鐘,取出稍停片刻,再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結(jié)合的APES,置通風(fēng)櫥中晾干即可。用此載玻片撈片時...
+
-
技術(shù)文章
血小板計數(shù)法(直接試管法)
1原理用一種能破壞血液中的紅細胞,但能保護血小板形態(tài)完整的稀釋液稀釋血液,滴入血細胞計數(shù)池,在高倍鏡下直接計數(shù)血小板數(shù)。2器材和試劑器材同白細胞計數(shù)法。稀釋液用許汝和氏尿素稀釋液。許汝和氏尿素稀釋液配制法:尿素10g,福爾馬林0.1ml,枸櫞酸鈉0.5g,加水至100ml,溶解后過慮,在冰箱內(nèi)保存。3操作步驟a.用2ml吸管準確吸取血小板稀釋液0.38ml置小試管中。b.從耳垂采血,用0.02ml吸管準確吸取*滴血,吹入稀釋液中,并吹吸兩次洗凈吸管壁內(nèi)的血。c.充分振搖,滴入...
+
-
技術(shù)文章
白細胞計數(shù)法(試管法)
1原理用稀乙酸將血液稀釋20倍,使紅細胞全部溶解,滴入白細胞計數(shù)池中,在顯微鏡下計數(shù),求得每立方毫米血液中的白細胞數(shù)。2器材和試劑2.1器材生物顯微鏡、Neubauer氏血細胞計數(shù)池、0.02ml吸管、小試管、刺血針、2ml吸管。2.2試劑白細胞稀釋液:采用3%乙酸溶液。3稀釋液的配制采用3%乙酸溶液。即取冰乙酸3ml,加蒸餾水至100ml混合。亦可于上述稀釋液中加美藍或龍膽紫液1~2滴,便于觀察。稀釋液應(yīng)經(jīng)常過濾,以除去塵埃、異物或微生物的影響。4方法4.1取血于小試管中加...
+
-
技術(shù)文章
影響ELISA試驗效果常見問題原因分析及解決辦法
ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標本分離不好即進行加樣;2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是...
+
-
技術(shù)文章
實驗采血要點
材料與試劑1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。(2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一種螯合劑。用生理鹽水配制成4%的溶液備用。(3)阿氏液(Alsever液),配方如下:枸櫞酸鈉(Na3C6H5O7·5H2O)0.80g枸櫞酸0.0325g葡萄糖2.05g氯化鈉0.42gH2O加至100.00ml...
+
-
技術(shù)文章
血細胞分離原理
在體外進行細胞免疫檢測時,首先必須進行淋巴細胞的分離。分離淋巴細胞的方法很多,但不管采用哪種方法,均要求分離的淋巴細胞純度高、產(chǎn)量多,而且不喪失活性,同時也要求分離技術(shù)簡單、操作方便。外周血液中紅細胞和白細胞的比例在幾百甚至上千比一,兩類細胞的大小和密度不同,其沉降速度也就不同。紅細胞的自然沉降率較快,加入高分子量的聚合物,如明膠、右旋糖酐等還可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度離心法或二者結(jié)合,可以將淋巴細胞從血液中分離出來。這種分離出的淋巴細胞一般包括單核細胞。除去單...
+
-
技術(shù)文章
ELI-SPOT 及其應(yīng)用
一、原理ELI-SPOT,即斑點ELISA,是利用酶標板作反應(yīng)容器進行的酶聯(lián)免疫反應(yīng)。其基本原理與ELISA相同。首先用捕獲抗體包被反應(yīng)板,封閉后,依次加入待檢標本、生物素化檢測抗體、鏈霉菌抗生物素蛋白-堿性磷酸酶及底物,陽性結(jié)果出現(xiàn)斑點顯色,利用倒置顯微鏡進行斑點計數(shù)。其優(yōu)勢在于可在與體內(nèi)(活體條件)極接近的條件下,在體外對細胞分泌成分(如細胞因子、Fas等)進行追蹤研究。幾點說明:l反應(yīng)板:ELI-SPOT所用的反應(yīng)板可以是PVDF膜包被好的,也可以是普通酶標板。如用普通...
+
-
技術(shù)文章
細胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動態(tài)分析
細胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動態(tài)分析通過Indo-1、Fluo-2、Fluo-3、Calciumgreen、SNARF等多種熒光探針,可對細胞內(nèi)鈣離子、鈉離子及PH值等作熒光標記并對它們進行比率值和濃度梯度變化測定。由于細胞內(nèi)鈣離子為傳遞信息的第二信使,對細胞生長分化起著重要作用,通過單標記或雙標記對細胞內(nèi)鈣離子和其它離子的熒光強度和分布測定,測定樣品達到毫秒級的快速變化。借助光學(xué)切片功能可以測量樣品深層的熒光分布以及細胞光學(xué)切片的生物化學(xué)特性的變化。通過不同時間段的檢測可...
+
-
技術(shù)文章
重組人的載脂蛋白E2 ApoE2
Synonyms:ApolipoproteinE2Description:ApoEbelongstoagroupofproteinsthatbindreversiblywithlipoproteinandplayanimportantroleinlipidmetabolism.Inadditiontofacilitatingsolublizationoflipids,theseproteinshelptomaintainthestructuralintegrityoflipo...
+
-
技術(shù)文章
脂聯(lián)素和肥胖的關(guān)系
脂聯(lián)素的概念A(yù)diponectin(脂聯(lián)素)是脂肪細胞分泌的一種內(nèi)源性生物活性多肽或蛋白質(zhì).人體內(nèi)的Adiponectin(脂聯(lián)素)由244個氨基酸組成,分子量為30KD.Adiponectin(脂聯(lián)素作為一種胰島素增敏激素(AnInsulin-sensitizingHormone),可以增加促進骨骼肌細胞的脂肪酸氧化和糖吸收,明顯加強胰島素的糖元異生作用,抑制肝臟的糖生成,是機體的脂質(zhì)代謝和血糖穩(wěn)態(tài)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的重要調(diào)節(jié)因子.日本學(xué)者近來證明Adiponectin(脂聯(lián)素)...
+
-
技術(shù)文章
人腫瘤壞死因子(TNFα elisa kit)酶聯(lián)免疫法定量檢測試劑盒
人腫瘤壞死因子酶聯(lián)免疫法定量檢測試劑盒HumanTNF-aELISAKit產(chǎn)品描述:腫瘤壞死因子(TNF)是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細胞因子,主要由激活的單核-巨噬細胞所分泌,參與機體的免疫調(diào)節(jié)與炎癥反應(yīng),也是某些感染性疾病和肝臟損傷的致病因素。正常人體液中的TNF水平一般在100pg/ml以下,當(dāng)患有某些疾病時,TNF水平可有不同程度增高。因此,檢測患者體液中的TNF水平,具有一定的臨床意義。本試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測法測定人血漿或血清中的TNF,包被抗體及檢測抗體采...
+